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分光光度計(jì)在各行各業(yè)都有著廣泛的應(yīng)用，是眾 與重復(fù)性、光譜帶寬、吸收池配套性等。使用到的標(biāo)多產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)的重要計(jì)量器具，其量值的準(zhǔn)確可靠 準(zhǔn)器主要有波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、透射比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)石對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響深遠(yuǎn)。分光光度計(jì)的檢定依據(jù)的是 英吸收池等。本文結(jié)合實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)出影響分JJG 178-2007《紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)》，主要 光光度計(jì)檢定結(jié)果的主要因素，期望對(duì)檢定人員的工檢定項(xiàng)目有波長(zhǎng)示值誤差與重復(fù)性、透射比示值誤差 作有所幫助。

 分光光度計(jì)檢定結(jié)果的影響因素主要包括六個(gè)方面，分別是標(biāo)準(zhǔn)器的選擇、波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性項(xiàng)目波長(zhǎng)檢定點(diǎn)的選擇、儀器的光譜帶寬、透射比示值誤差和重復(fù)性項(xiàng)目波長(zhǎng)檢定點(diǎn)的選擇、標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池的配套性、濾光片的狀態(tài)。

1 標(biāo)準(zhǔn)器的選擇

JJG 178-2007 中列舉了用到的9 種波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的波長(zhǎng)示值誤差及重復(fù)性項(xiàng)目，并對(duì)它們適用的波段進(jìn)行了規(guī)定。這里特別要注意“標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片”它不適用于檢定Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)分光光度計(jì)。這主要是因?yàn)楦缮鏋V光片的波長(zhǎng)定值不確定度比較大，一般在0.4~0.9nm，已經(jīng)接近或超過(guò)Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)的技術(shù)指標(biāo)。即便如此，檢定中也要注意干涉濾光片證書(shū)中提供的定值不確定度是否足夠滿足Ⅲ級(jí)分光光度計(jì)的檢定要求。

2 波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性項(xiàng)目波長(zhǎng)檢定點(diǎn)的選擇

JJG 178-2007 規(guī)定，檢定分光光度計(jì)A、B 段波長(zhǎng)示值誤差和重復(fù)性，每間隔100nm 至少選擇一個(gè)波長(zhǎng)檢定點(diǎn)。各計(jì)量檢定機(jī)構(gòu)一般選擇使用氧化鈥濾光片和鐠釹濾光片作為標(biāo)準(zhǔn)器。因其易于保存，使用方便，而且吸收峰的數(shù)量多。但是并非所有的吸收峰都適用于各級(jí)分光光度計(jì)的檢定。氧化鈥濾光片和鐠釹濾光片是按JJG 1034-2008《光譜光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)濾光器》進(jìn)行檢定的，此規(guī)程根據(jù)吸收峰的峰高、尖銳程度、對(duì)稱性、年變化量的不同定義了一級(jí)峰和二級(jí)峰。峰高越高、越尖銳、對(duì)稱性越好、年變化量越小，其定值不確定度就越小。對(duì)于達(dá)不到一級(jí)峰和二級(jí)峰標(biāo)準(zhǔn)的吸收峰，一般計(jì)量部門都會(huì)將其作為“參考峰”列出。但應(yīng)該注意的是，因“參考峰”的峰形差、年變化量大，應(yīng)盡量避免選擇其作為波長(zhǎng)檢定點(diǎn)。

3儀器光譜帶寬的影響

儀器的光譜帶寬，指的是從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的二分之一高度處的譜帶寬度。用來(lái)表征儀器的光譜分辨率。對(duì)于同一臺(tái)儀器，光譜帶寬越大，測(cè)量光束能量越強(qiáng)，儀器數(shù)值越穩(wěn)定，反之，儀器數(shù)值越不穩(wěn)定。高等級(jí)的分光光度計(jì)通?？梢宰杂稍O(shè)置不同的光譜帶寬。但是一些低等級(jí)的儀器往往只能固定某個(gè)光譜帶寬。而且為了降低成本的同時(shí)追求數(shù)值的穩(wěn)定，往往選用更大的光譜帶寬。

檢定分光光度計(jì)時(shí)，儀器的光譜帶寬應(yīng)與所使用標(biāo)準(zhǔn)器定值時(shí)的光譜帶寬保持一致，否則將對(duì)波長(zhǎng)示值誤差的檢定結(jié)果造成影響，對(duì)于固定帶寬的分光光度計(jì)更要特別注意這點(diǎn)。但是目前氧化鈥濾光片和鐠釹濾光片的檢定部門通常只提供2nm 帶寬下的檢定結(jié)果。并不適用于市面上的固定5nm 帶寬（或其它更大帶寬）儀器的檢定。此時(shí)，應(yīng)向?yàn)V光片的檢定部門要求提供不同帶寬下的濾光片檢定結(jié)果。對(duì)于不同帶寬下濾光片的峰值波長(zhǎng)檢定結(jié)果的差異的比較見(jiàn)表1。

從中可以看出，2nm 帶寬與5nm 帶寬下的峰值波長(zhǎng)大相差2.54nm，已經(jīng)超過(guò)了Ⅱ級(jí)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)允差1.0nm。如果不使用儀器對(duì)應(yīng)帶寬下的標(biāo)準(zhǔn)峰值波長(zhǎng)數(shù)據(jù)，將對(duì)檢定結(jié)果造成嚴(yán)重影響，甚至影響儀器級(jí)別判定。

4 透射比示值誤差和重復(fù)性項(xiàng)目波長(zhǎng)檢定點(diǎn)的選擇

JJG 178-2007 規(guī)定，分光光度計(jì)透射比示值誤差和重復(fù)性的檢定，在紫外區(qū)可以使用紫外透射比標(biāo)準(zhǔn)溶液在235nm、257nm、313nm、350nm 處檢定，或使用紫外區(qū)透射比濾光片檢定；在可見(jiàn)區(qū)可以使用光譜中性濾光片在440nm、546nm、635nm 處檢定。JJG 178-2007 規(guī)定，可以用紫外標(biāo)準(zhǔn)溶液檢定分光光度計(jì)紫外區(qū)透射比示值誤差和重復(fù)性，這就需要使用到標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池。JJG 178-2007 還規(guī)定了配套的標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池透射比配套誤差不大于0.2%。但是在日常檢定工作中，由于需要經(jīng)常清洗擦拭，標(biāo)準(zhǔn)吸收池的透射比配套性往往不能一直保持不大于0.2% 的良好狀態(tài)。這就要求經(jīng)常檢定標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池的配套性是否符合要求，以免對(duì)測(cè)量結(jié)果造成影響。

6 濾光片狀態(tài)的影響
濾光片表面留下灰塵和指紋，如果不注意及時(shí)清潔，將對(duì)檢定結(jié)果造成不可預(yù)計(jì)的影響，尤其對(duì)透射比示值誤差的影響大。濾光片表面的污垢將直接造成其實(shí)際透過(guò)率降低，造成檢定結(jié)果不準(zhǔn)確。輕微的灰塵往往難以查覺(jué)，一個(gè)簡(jiǎn)單有效的辦法是用一個(gè)強(qiáng)光源（手機(jī)LED 補(bǔ)光燈）沿表面平行方向低角度照射濾光片，細(xì)微的灰塵會(huì)將光線散射而被觀察到，然后使用絨布和氣吹清潔濾光片表面，使之保持清潔。

7 結(jié)語(yǔ)

影響分光光度計(jì)檢定結(jié)果的因素還有很多，本文所列是容易被檢定員忽視的因素。只有更加注意檢定過(guò)程中的影響因素和細(xì)節(jié)，才能提高分光光度計(jì)檢定的水平，從而保證檢定結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。